PCR*新技术原理、方法及应用(第三版)电子书

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前言

目录

第一章 绪 论

第一节 PCR发展简史

第二节 PCR技术的基本原理和操作

一、PCR的基本原理

二、PCR的基本成分

三、PCR的基本操作

第三节 PCR的主要应用

一、基础研究方面的应用

二、临床上的应用

三、在法医学中的应用

四、在其它方面的应用

参考文献

第二章 扩增已知序列两侧DNA的PCR

第一节 反向PCR

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第二节 锚定PCR

一、引言

二、原理

三、用连接锚定PCR从基因文库中扩增已知基因侧翼序列

四、用互补锚定PCR直接扩增已知序列侧翼cDNA序列

五、问题及对策

六、小结

第三节 RACE——cDNA末端的快速扩增

一、引言

二、RACE基本原理

三、实验方案

四、RACE的应用

五、小结

第四节 连接介导的PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、操作步骤

五、注意事项

六、应用

七、小结

第五节 Bubble－PCR

一、引言

二、原理

三、材料与方法

四、注意事项

五、应用

六、小结

参考文献

第三章 巢式PCR

第一节 常规巢式PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用与小结

第二节 半巢式PCR

一、引言

二、材料

三、方法

四、注意事项

五、应用与小结

第三节 反转录巢式PCR

一、引言

二、材料

三、方法

四、注意事项

五、应用

第四节 共有序列巢式PCR

一、引言

二、材料

三、方法

四、注意事项

五、应用与小结

第五节 种特异巢式PCR

一、引言

二、材料

三、方法

四、注意事项

五、应用与小结

第六节 巢式PCR－变性梯度凝胶电泳

一、引言

二、材料

三、方法

四、注意事项

五、应用与小结

第七节 巢式PCR－限制性片段长度多态性

一、引言

二、材料

三、方法

四、注意事项

五、应用与小结

参考文献

第四章 实时荧光定量PCR

第一节 实时荧光定量PCR原理

一、引言

二、概念及原理

第二节 实时荧光定量PCR中的荧光化学物质

一、引言

二、荧光染料

三、水解探针

四、分子信标

五、双杂交探针

六、复合探针

第三节 实时荧光定量PCR的定量方法

一、绝对定量

二、相对定量

第四节 实时荧光定量PCR的实验方法

一、实时荧光定量PCR

二、实时定量RT－PCR

三、多重实时定量PCR

四、多重实时定量RT－PCR

五、实验方案的优化

六、实践中应注意的问题

第五节 实时荧光定量PCR技术的应用

一、在病原体检测中的应用

二、在肿瘤研究中的应用

三、在基因表达研究中的应用

四、在细胞因子表达分析中的应用

五、在遗传学及SNP分析上的应用

六、小结

参考文献

第五章 致突变PCR

第一节 利用易错DNA聚合酶进行随机突变

一、原理

二、实验方案

三、注意事项

四、讨论

五、应用

第二节 利用PCR引物构建位点特异突变体

一、方法1： 利用重叠延伸PCR构建定点突变体

二、方法2： 利用大引物PCR构建定点突变体

三、方法3： 利用重组PCR进行扫描突变

四、讨论

五、应用

六、小结

参考文献

第六章 测定基因突变的PCR

第一节 多重PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、常见问题的解决

六、应用

七、小结

第二节 常用的等位基因特异性PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、对等位基因特异PCR的改进

七、应用与小结

第三节 简单等位基因辨别PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用与小结

第四节 L－DNA标记的等位基因特异性PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用与小结

第五节 同源一步荧光等位基因特异性PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用与小结

第六节 低温变性共扩增PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、小结

第七节 限制性片段长度多态性PCR

一、原理

二、材料

三、操作方法

四、注意事项

五、应用

第八节 PCR－变性梯度凝胶电泳

一、原理

二、材料

三、操作方法

四、注意事项

五、应用

参考文献

第七章 测序和DNA合成PCR

第一节 不对称PCR

一、引言

二、引物浓度不对称PCR

三、热 （引物长度） 不对称PCR

四、应用

五、小结

第二节 PCR测序法

一、直接测序法

二、循环测序法

三、全自动DNA测序法

四、应用

第三节 乳化液PCR

一、引言

二、原理

三、材料和方法

四、应用

五、小结

第四节 基于PCR的大片段DNA的合成

一、引言

二、基本原理

三、目的序列、寡核苷酸和测序引物的设计

四、操作步骤

五、DNA合成时常出现的问题及解决办法

六、小结

参考文献

第八章 免疫PCR

第一节 免疫PCR技术

一、引言

二、基本原理

三、材料和试剂

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第二节 免疫捕捉PCR

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第三节 PCR－ELISA

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第四节 原位PCR

一、引言

二、基本原理

三、原位PCR方法分类及其设计方案

四、原位PCR基本步骤

五、原位PCR方法的选择

六、原位PCR操作注意事项

七、原位PCR存在的问题和结果分析

八、原位PCR的应用

九、原位PCR操作程序示例

十、小结

参考文献

第九章 PCR芯片

第一节 PCR芯片的结构及其工作原理

一、引言

二、原理

三、方法

四、应用

五、小结

第二节 纳升高通量PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第三节 微流控PCR

一、引言

二、原理

三、材料（以不对称螺旋管芯片微流控PCR为例）

四、方法（以不对称螺旋管芯片微流控PCR为例）

五、应用

六、小结

第四节 连续流热梯度PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、操作方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第五节 PCR芯片的应用

一、引言

二、应用

三、注意事项

四、小结

参考文献

第十章 数字PCR实验方法

第一节 数字PCR概述

一、引言

二、数字PCR系统分类

第二节 数字PCR技术关键点分析

一、PCR微流控芯片

二、连续流PCR微流控芯片

三、微滴PCR技术

四、微阀、微泵和微混合器与PCR微流控芯片的关系

五、dPCR与液滴微流控芯片的结合和应用

第三节 数字PCR的应用

一、在突变检测方面的应用

二、病毒载量的绝对定量操作方法

参考文献

第十一章 核酸恒温扩增技术的 原理、方法及应用

第一节 聚合酶螺旋扩增技术的 原理、方法及应用

一、基本原理

二、方法

三、结果分析

四、注意事项

五、小结

第二节 环介导等温扩增技术的 原理、方法及应用

一、基本原理

二、方法

三、结果分析

四、注意事项

五、应用

六、小结

第三节 重组酶聚合酶扩增技术的 原理、方法及应用

一、基本原理

二、器材

三、实验方法

四、结果分析

五、注意事项

六、应用

七、小结

参考文献

第十二章 其它PCR方法

第一节 高（G+C）含量DNA的PCR扩增

一、使用增强剂改善高（G+C）含量DNA模板的PCR扩增

二、NaOH对模板进行预处理改善高（G+C）含量DNA的PCR扩增

三、利用高温PCR体系改善高（G+C）含量DNA模板的PCR扩增

四、应用

五、小结

第二节 长片段PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第三节 利用热激活引物进行热启动PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第四节 融合PCR

一、 引言

二、融合PCR的原理

三、 应用于基因插入的融合PCR的具体操作步骤

四、 融合PCR的应用

五、 融合PCR操作方法的注意事项

六、小结

第五节 不依赖连接反应的克隆PCR

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

第六节 菌落PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、操作方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

参考文献

第十三章 PCR在基因分型中的应用

第一节 任意引物PCR

一、引言

二、任意引物PCR的基本原理及技术特点

三、AP－PCR 方法

四、RAP－PCR方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第二节 通用PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第三节 rep－PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第四节 序列特异性引物PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用与小结

第五节 简单序列重复区间PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第六节 钳制PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

第七节 序列特异性寡核苷酸多态性PCR

一、原理

二、试剂

三、方法

四、注意事项

五、应用

参考文献

第十四章 PCR在临床诊断及 流行病调查中的应用

第一节 表位特异PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、应用

六、小结

第二节 双标记PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、应用

六、注意事项

第三节 降落PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、降落PCR与常规PCR的比较

六、应用

七、小结

第四节 16S rRNA PCR

一、引言

二、原理

三、材料及设备

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第五节 PCR偶联连接酶链式反应

一、原理

二、材料

三、方法

四、注意事项

五、应用

第六节 快速PCR

一、引言

二、原理

三、实验方法

四、应用

五、小结

第七节 稀有限制性位点PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

参考文献

第十五章 PCR在法医学中的应用

第一节 小卫星可变重复序列PCR

一、引言

二、原理

三、方法

四、应用

五、小结

第二节 短串联重复序列的PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第三节 单核苷酸多态性PCR

一、引言

二、原理

三、 材料及方法

四、SNP－PCR检测方法

五、数据库

六、应用

七、小结

第四节 全基因组PCR

一、引言

二、全基因组PCR的种类

三、基因组DNA模板的制备

四、不同WGA方法的比较

五、WGA的产物分析及应用

六、小结

第五节 单分子PCR

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、SM－PCR的应用

七、小结

参考文献

第十六章 PCR在癌症诊断中的应用

第一节 甲基化特异PCR

一、 引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第二节 差异显示PCR

一、引言

二、原理

三、方法

四、应用

五、小结

第三节 PCR－单链构象多态性

一、原理

二、材料

三、方法

四、注意事项

五、应用

第四节 单细胞PCR

一、引言

二、基本原理

三、材料和方法

四、注意事项

五、应用

六、小结

第五节 PCR检测肿瘤细胞端粒酶活性

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结与展望

参考文献

第十七章 PCR在动物学中的应用

第一节 微卫星PCR在 动物分类和进化中的应用

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第二节 巢式PCR在动物疾病诊断中的应用

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第三节 T接头介导PCR在转基因 动物外源基因定位中的应用

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第四节 等温扩增技术在动物学中的应用

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

参考文献

第十八章 PCR技术在基因修饰 动物研究中的应用

第一节 PCR技术在基因修饰 动物基因型鉴定中的应用

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

第二节 PCR技术用于转基因动物细胞中 外源基因整合位点的分析

一、方案一：反向PCR

二、方案二：连接介导PCR法

三、方案三：热不对称交错PCR

第三节 PCR技术用于转基因动物细胞中 外源基因整合拷贝数的分析

一、方案一：实时荧光定量PCR比较CT法检测转基因动物中外源基因的拷贝数

二、方案二：实时荧光定量PCR标准曲线绝对定量法检测转基因动物中外源基因的拷贝数

三、方案三：利用微滴数字PCR分析转基因动物中外源基因的拷贝数

参考文献

第十九章 实时荧光定量PCR 在动物疫病定量检测中的应用

第一节 实时荧光定量PCR在大家畜 （猪、牛、羊）传染病中的诊断应用

一、引言

二、原理

三、器材

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第二节 实时荧光定量PCR在 家禽传染病（禽流感）中的诊断应用

一、引言

二、原理

三、材料

四、方法

五、结果分析

六、注意事项

七、应用

八、小结

第三节 实时荧光定量PCR在 水生动物疫病定量检测中的应用

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

参考文献

第二十章 PCR在植物学中的应用

第一节 ISSR－PCR在植物分类学中的应用

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第二节 TAIL－PCR在转基因植物研究中的应用

一、引言

二、基本原理

三、材料

四、方法

五、注意事项

六、应用

七、小结

第三节 多重PCR在植物基因检测中的应用

一、引言

二、基本原理

三、多重PCR的实验方法

四、多重PCR设计方法及注意事项

五、多重PCR在植物生物学研究中的应用

六、多重PCR应用前景

参考文献