中药化学与天然药物化学实验指导(十三五)电子书

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《中药化学与天然药物化学实验指导》编委会

编写说明

第一部分　常用中药（天然药物）化学成分提取、分离、纯化基本操作技术

第一节　中药（天然药物）化学成分溶剂提取法操作技术

一、浸渍法操作技术

二、渗漉法操作技术

三、煎煮法操作技术

四、回流提取法操作技术

（一）回流提取基本原理

（二）回流提取法操作步骤

（三）回流提取操作注意事项

（四）回流提取的工艺特点

五、连续回流提取法操作技术

（一）连续回流提取法的基本原理

（二）连续回流提取法的操作步骤

（三）连续回流提取法的操作规范

1.索氏提取器的安装操作

2.索氏提取器使用的注意事项

（四）连续回流提取法的优点

1.选择性好

2.能耗低

3.设备简单、操作简便

第二节　减压蒸馏（旋转蒸发仪）

一、旋转蒸发仪操作步骤

1.抽真空

2.加料

3.加热

4.操作注意事项

二、小型旋转蒸发仪基本操作流程

三、中型旋转蒸发仪操作流程

第三节　薄层层析操作技术

一、概述

（一）薄层色谱系统的组成部分

（二）薄层色谱技术的特点

（三）薄层色谱法在中药（天然药物）方面的应用

（四）薄层色谱法在西药方面的应用

（五）薄层色谱法在其他方面的应用

二、薄层色谱法主要类型和原理

（一）吸附薄层色谱

1.吸附薄层色谱基本原理

2.吸附薄层色谱中对固定相的要求

3.吸附薄层色谱对流动相的要求

（二）分配薄层色谱

1.分配薄层色谱法的基本原理

2.分配薄层色谱对固定相的要求

3.分配薄层色谱对流动相的要求

三、薄层色谱法的操作技术

（一）吸附剂的选择

1.样品的溶解度

2.样品的酸碱性

3.样品的极性

4.吸附剂对样品的作用

（二）薄层板的制备方法

1.手工制板

2.预制板

3.薄层板的活化及活度标定

4.薄层板的预处理

（三）展开剂的制备

1.展开剂选择的一般原则

2.展开剂选择的方法

3.展开剂的配制方法及注意事项

（四）供试品的制备

1.样品的预处理和制备

2.供试品的制备

3.对照品溶液的制备

（五）点样

1.点样装置

2.点样方式

3.点样操作时的注意事项

（六）展开

1.展开方式的分类

2.展开的操作方法

（七）显色定位

1.光学显色定位法

2.蒸气显色定位法

3.试剂显色定位法

4.显色试剂

（八）检测

1.定性检测

2.定量检测

（九）薄层色谱中常出现的问题及解决方法

1.拖尾

2.边缘效应

3.S形及波浪形斑点

4.念珠状斑点

5.展开后斑点Rf值相差悬殊

6.色谱斑点Rf值不稳定

四、纸层析操作

（一）纸层析基本原理

（二）纸层析操作技术

1.下行法

2.上行法

3.注意事项

第四节　常压柱色谱、低压柱色谱、常用填料前处理及再生操作技术

一、常压柱色谱

1.吸附柱色谱分离原理

2.洗脱剂的选择

3.色谱柱的选择

4.填料的选择

5.装柱的方法

6.上样的方法

7.展开与洗脱

二、低压柱色谱

1.减压柱色谱

2.加压柱色谱

三、常用填料前处理及再生

1.硅胶、氧化铝

2.葡聚糖凝胶（Sephadex LH-20）

3.大孔吸附树脂

第五节　结晶操作

一、结晶的条件

二、制备结晶的操作方法

第六节　纯度检验操作

一、熔点法（mp）

二、薄层层析法（TLC）

三、纸层析法（PC）

四、气相色谱法（GC）

五、高效液相色谱法（HPLC）

六、核磁共振氢谱（1H-NMR）和核磁共振碳谱（13C-NMR）

第七节　设计性实验流程与方案设计

一、实验目的

二、实验内容

1.选题

2.文献查阅和总结

3.实验方案设计

4.实验方案的实施

5.实验结果讨论

6.完成实验报告

7.提交样品

三、实例

第二部分　常见中药（天然药物）化学成分的提取、分离、纯化、鉴定

实验一　糖和苷类化合物

一、苷类的一般性质实验

（一）目的要求

（二）原理

（三）鉴别反应及操作

1.样品溶液的制备

2.鉴别反应

3.注意事项

二、苦杏仁苷的提取、分离

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

实验二　醌类化合物

一、蒽醌类成分的一般性质实验

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）鉴别反应及操作

1.供试液的制备

2.操作过程

二、紫草中醌类成分的提取及初步分离

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

三、虎杖中蒽醌类化合物的提取、分离与鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

1.虎杖中主要成分的物理性质

2.提取分离原理

（三）提取分离方法

1.乙醇总提取物的制备

2.总游离蒽醌的提取

3.游离蒽醌的分离

4.白藜芦醇葡萄糖苷的分离

（四）鉴定

1.薄层色谱鉴定

2.定性反应

（五）思考题

四、大黄中蒽醌类成分的提取、分离与鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）提取方法及操作流程

1.大黄中蒽醌类成分提取分离流程

2.大黄中总蒽醌苷元的提取

3.大黄中蒽醌苷元的分离和精制

（四）鉴定

1.蒽醌类成分化学鉴定

2.色谱鉴定

实验三　香豆素和木脂素

一、香豆素类成分的一般性质实验

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）鉴别反应及操作

1.供试液的制备

2.鉴别反应

二、秦皮中七叶苷与七叶内酯的提取、分离及鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取方法及操作流程

（五）鉴定

1.化学检识

2.薄层鉴定

三、连翘苷的提取、分离与鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

（五）色谱鉴定

实验四　黄酮类化合物

一、黄酮类成分的一般性质实验

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）鉴别反应及操作

1.供试液的制备

2.鉴别反应

二、槐米中芦丁的提取、分离与鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

（五）苷和糖鉴定方法

1.芦丁的水解及葡萄糖、鼠李糖的鉴定

2.槲皮素的乙酰化及芦丁、槲皮素的鉴定

三、沸水法提取黄芩苷

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

（五）黄芩苷水解、糖与苷元的鉴定

1.水解方法

2.糖的鉴定

3.显色剂

实验五　萜类和挥发油

一、挥发油的定性鉴别

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）鉴别反应及操作方法

1.外观性质

2.挥发性

3.pH检查（检查游离酸或酚类）

4.荧光素试验

5.香草醛-60%H2SO4试验

6.FeCl3试验（检查酚类）

7.苯肼试验（检查醛、酮类）

8.溴反应（检查薁类）

9.亚硝酰铁氰化钠反应（检查内酯类）

二、木姜子挥发油的提取及鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取挥发油流程

（五）鉴别与检识

1.pH检查

2.香草醛-60%H2SO4试验

3.苯肼试验（检查醛、酮类）

三、薄荷中薄荷油及薄荷脑的提取分离

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

四、穿心莲内酯的提取、分离与鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

（五）鉴定

1.α，β-不饱和内酯反应

2.薄层层析

实验六　皂苷类化合物

一、皂苷的定性鉴别

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）鉴别反应及操作方法

1.供试液制备

2.实验操作步骤

二、薯蓣皂苷元的提取、分离及鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

（五）鉴定

三、齐墩果酸的提取、分离及鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）提取分离流程

1.提取

2.分离与精制

（四）鉴定

1.显色反应

2.薄层色谱鉴别

实验七　强心苷类化合物

一、强心苷的定性鉴别

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）鉴别反应及操作方法

1.供试液的制备

2.实验操作

二、黄花夹竹桃中黄夹苷的提取、分离和鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

1.前处理

2.脱脂

3.酶解

4.提取

5.精制

（五）鉴定

1.纸色谱鉴定

2.TLC鉴定

3.黄夹苷的理化鉴别

实验八　生物碱

一、生物碱的一般鉴别

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）生物碱类成分的鉴别

1.供试液的制备

2.初试

3.进一步实验

4.注意事项

二、黄连中盐酸小檗碱的提取、分离与鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

（五）纯化及鉴定

1.盐酸小檗碱的纯化（氧化铝柱层析法）

2.盐酸小檗碱的鉴定（纸层析法）

三、洋金花中总生物碱的提取、分离与鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

（五）鉴定

四、苦参中氧化苦参碱和苦参碱的提取、分离及鉴定

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）提取分离流程

1.提取分离

2.纯化

（四）鉴定

五、一叶萩碱的提取、分离与鉴定

（一）实验目的

（二）实验原理

（三）提取分离流程

（四）鉴定

1.生物碱的定性试验

2.薄层鉴定

3.显微熔点测定

六、延胡索生物碱的系统分离与鉴定

（一）实验目的

（二）实验原理

（三）提取分离流程

（四）鉴定

1.预试

2.生物碱的系统分离及鉴定

实验九　鞣　质

一、鞣质类化合物的鉴别

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）鉴别反应及操作方法

1.供试液的制备

2.鉴别试验

二、虎杖中鞣质的提取、分离

（一）目的要求

（二）实验原理

（三）仪器与试剂

（四）提取分离流程

实验十　中药（天然药物）化学成分的系统预试验

一、目的要求

二、实验原理

三、仪器与试剂

四、实验步骤

（一）记录及预测

（二）预试中药（天然药物）处理

（三）预试液的制备

1.水提取液

2.乙醇提取液

3.酸性乙醇提取液

4.石油醚提取液

（四）各类成分的检查

1.检查生物碱类

2.检查氨基酸、多肽和蛋白质类

3.检查还原糖、多糖和苷类

4.检查皂苷类

5.检查有机酸类

6.检查酚类化合物和鞣质类

7.检查甾体及三萜类化合物

8.检查黄酮类化合物

9.检查内酯、香豆素及其苷类

10.检查强心苷类

11.检查蒽醌类

12.检查挥发油、油脂类

（五）圆形滤纸色谱预试法

1.操作步骤

2.各类成分鉴定所用显色剂

（六）各类成分的层析检查

（七）预试结果判断

（八）实验说明及注意事项

（九）预试报告记录

附录

附录一　常用有机溶剂的理化常数和精制方法

1.甲醇CH3OH

2.乙醇CH3CH2OH

3.丙醇CH3CH2CH2OH

4.异丙醇CH3CHOHCH3

5.正丁醇CH3（CH2）2CH2OH

6.正戊醇CH3（CH2）3CH2OH

7.乙醚C2H5OC2H5

8.丙酮CH3COCH3

9.丁酮（甲基丙酮）CH3CH2COCH3

10.乙酸乙酯CH3COOC2H5

11.甲酸HCOOH

12.冰乙酸CH3COOH

13.四氢呋喃C4H8O

14.吡啶C5H5N

15.二乙胺（C2H5）2NH

16.乙二胺H2NCH2CH2NH2

17.甲酰胺HCONH2

18.二甲基甲酰胺（DMF）HCON（CH3）2

19.三氯甲烷（氯仿）CHCl3

20.四氯化碳CCl4

21.二氯乙烷ClCH2CH2Cl

22.二硫化碳CS2

23.二氯甲烷CH2Cl2

附录二　乙醇浓度稀释表

附录三　常用鉴定试剂的配制和应用

一、通用试剂

二、生物碱鉴定试剂

三、糖类鉴定试剂

四、醌类及蒽醌类衍生物鉴定试剂

五、香豆素类鉴定试剂

六、黄酮类鉴定试剂

七、萜类、挥发油、强心苷、甾体、皂苷鉴定试剂

八、氨基酸、蛋白质鉴定试剂

九、酚类、鞣质鉴定试剂

十、有机酸鉴定试剂

附录四　缓冲液的配制

1.枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液

2.乙酸-乙酸钠缓冲液

3.Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液

附录五　常用干燥剂的选择和使用

1.无水氯化钙CaCl2

2.无水硫酸镁MgSO4

3.无水硫酸钠Na2SO4

4.无水硫酸钙CaSO4

5.无水碳酸钾K2CO3

6.固体氢氧化钾KOH或氢氧化钠NaOH

7.五氧化二磷P2O5

8.浓硫酸H2SO4

9.金属钠（Na）

附录六　恒沸点混合物

附录七　常用酸碱的浓度

附录八　常见薄层层析板的规格

附录九　国产层析滤纸的性能与规格

附录十　国产离子交换树脂的型号和技术指标

附录十一　国产葡聚糖凝胶的规格及技术数据